1. 抗原選擇:
在實驗中,可以使用蛋白質、多肽、細胞器、細胞和組織等作為抗原。根據(jù)不同的實驗需要,選擇合適的抗原進行免疫。
2. 免疫方式:
根據(jù)實驗要求,可以采用皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等方式進行免疫。根據(jù)動物的種類以及免疫物質的大小,選擇適合的注射方式。
3. 注射劑量:
根據(jù)免疫物質的大小和動物的種類,注射的劑量有所不同。下面是一個典型的注射劑量表,單位為微克(μg)。
>18-20kDa <18-20kDa
動物 抗原量 最佳抗原量 抗原量 最佳抗原量
兔子 20-200 100 50-400 200
小鼠 2-40 15 4-60 40
大鼠 10-50 30 20-150 50
綿羊 100-1000 200 200-1000 400
母雞 20-200 100 50-400 200
4. 注意事項:
- 初次免疫時,使用完全佐劑與免疫原混合;加強免疫時使用不完全佐劑與免疫原混合。
- 采用多點、時間間隔式免疫法,確保免疫效果的穩(wěn)定性和持久性。
- 如果使用細胞進行免疫,兔子每次免疫所需細胞量為2-3 x 107 cells。
- 在連續(xù)免疫完三次后,應進行ELISA檢測動物的抗體滴度。一般滴度能達到1:10,000-50,000。在處死動物前一周,應加強一次免疫。
- 如果使用小鼠免疫,可以在尾靜脈采集小量血液(約50µl),最后在取眼球時采集大量血液(約500-1000µl)。如果使用兔子進行免疫,可以在耳緣靜脈采集小量血液(約2mL),最后在心臟處采集大量血液(50-100mL)。
- 采集血液后,按血清制備的標準方法使用離心機將血清離心分離,并分裝成小份,儲存在-80°C的實驗室冰箱中。
在實驗過程中,高速離心機和離心管是必備設備,用于血清制備和離心過程。這些設備的正確使用是保證實驗質量的重要環(huán)節(jié)。
總之,實驗動物免疫方案需要根據(jù)具體實驗目的和實驗動物種類進行調整和優(yōu)化。在實驗過程中,嚴格遵守操作規(guī)范,并根據(jù)實驗結果進行進一步分析和研究,以獲得準確可靠的實驗數(shù)據(jù)。
我司提供實驗代測等技術服務,歡迎咨詢!
友情鏈接:
上海聯(lián)碩官網(wǎng)