細胞培養新手入門

細胞常規培養是在細胞房中進行，在超凈工作臺或生物安全柜中，把細胞處理好，根據需要加入細胞培養基，放入細胞培養瓶/皿或細胞培養板中，再放到帶有5% CO2 的37℃恒溫培養箱中培養。細胞就像花花草草，尤其是細胞株基本每天都要觀察、打理的哦！

培養的細胞從哪里來？

1.細胞株

簡單說就是買的或送的。

2.原代細胞

組織或血液中提取的。一般細胞株可以連續傳代，而原代細胞養著養著就掛了。

培養細胞的生長方式有哪些？

1.貼壁生長

必須貼附于支持物表面才能生長。見于各種腫瘤細胞等。（你把培養皿或培養瓶底朝上，細胞也不會掉下來。

2.懸浮生長

于懸浮狀態下即可生長，不需要貼附于支持物表面。見于各種造血系統腫瘤細胞等。

細胞完全培養基的組成有哪些？

基礎培養基：80-95%

血清：5-20%

碳酸氫鈉：2.0g/L

青、鏈霉素：各200單位/毫升

細胞傳代

何為細胞傳代？

細胞在培養器皿中生長一定時間后，被分開接種到新的培養器皿即為細胞傳代。

為什么要傳代？

簡單說就是“孩子”長大了，要“分家”！

細胞株在培養過程中數量會不斷增多，但是培養細胞的細胞瓶/皿的空間有限，就會導致細胞之間接觸過于緊密，會使得細胞增殖收到抑制，所以我們必須把其中一部分細胞轉移到別的細胞瓶/皿，讓細胞有足夠的生長空間。

什么時候傳代？

觀察培養基是否正常，細胞狀態如何，細胞密度如何，決定是否傳代。如培養基變黃，細胞長成致密單層等情況。

傳代方法有哪些？

1.懸浮生長細胞傳代

1)離心法傳代：離心1000轉/分去上清，沉淀物加新培養液后再混勻傳代。

2)直接傳代法：懸浮細胞沉淀在瓶壁上，將上清培養液去除1/2~2/3，然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代。

2.半懸浮生長細胞傳代

此類細胞部分呈現貼壁生長現象，但是貼壁不牢，可用直接吹打使細胞從瓶壁上脫落下來，進行傳代。

3.貼壁生長細胞傳代

采用胰酶消化法傳代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。

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