ELISA的原理和常見類型

原理

Elisa本質上是利用了抗原和抗體的特異性結合反應將待測物和酶連接，通過酶與底物產生顏色反應來定量檢測樣品中目的蛋白濃度。

常見類型

直接法：將抗原固定在板上，用酶標抗體直接檢測抗原。

間接法：將抗原固定在板上，先加入檢測抗體和抗原特異性結合，然后加入酶標二抗和底物顯色。

夾心法：將捕獲抗體固定在板上，與抗原結合后加入捕獲抗體，之后和直接法或間接法類似，區別在于捕獲抗體是否酶標記。

競爭法：將抗體固定在板上，一組加入樣品和酶標抗原混合液，另一組加入酶標抗原，樣品中的待測抗原越多，能競爭掉越多的酶標抗原，輸出信號越弱。故輸出信號和樣品中待測抗原濃度成反比。

優缺點

直接法：

操作簡單，不使用二抗避免交叉反應

標記一抗成本高，不使用二抗無信號放大

間接法：

成本低，二抗放大信號

使用二抗，交叉反應幾率增加

夾心法： 

特異性強，靈敏度高

抗原必須有至少兩個表位

競爭法：

可適用于低純度樣本

敏感度較差

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