弗氏佐劑在20世紀(jì)40年代由Jules Freund發(fā)明,通常被認為是目前動物實驗中經(jīng)常用的免疫佐劑,常用于動物免疫制備抗體。弗氏佐劑可以使抗原持續(xù)緩釋,同時又能非特異性地增強機體對抗原的特異性免疫應(yīng)答,增強相應(yīng)抗原的免疫原性或改變免疫反應(yīng)類型。
弗氏佐劑作用機制是什么?
弗氏佐劑的作用機制還沒有統(tǒng)一的認知,目前主流學(xué)術(shù)觀點有四種:
第一種觀點:弗氏佐劑增加抗原呈遞的表面積,易為巨噬細胞所吞噬;
第二種觀點:延長抗原在體內(nèi)的存留期,增加與免疫細胞接觸的機遇;
第三種觀點:增強抗原遞呈細胞遞呈及處理抗原的能力;
第四種觀點:誘發(fā)抗原注射部位及其局部淋巴結(jié)的炎癥反應(yīng),從而有利于刺激免疫細胞的增殖。
上述這些機制都可能提高初次免疫和加強免疫時機體所產(chǎn)生抗體的效價。
弗氏佐劑的使用方法有哪些?
弗氏佐劑與抗原乳化可按如下方法進行:
(1) 研磨法:先將弗氏佐劑加熱并取適量放入無菌的玻璃研缽內(nèi),待冷卻后再緩緩滴入等體積的抗原溶液,邊滴邊按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,繼續(xù)研磨一段時間,使之成為乳白色粘稠的油包水乳劑。
(2) 注射器混合法:將等量的弗氏佐劑和抗原溶液分別吸入兩個注射器內(nèi),兩注射器之間以一細膠管相連,注意排凈空氣,然后交替推動針管,直至形成粘稠的乳劑為止。
(3) 超聲:實驗室條件好點的,比如說有超聲破碎儀的,一定要控制超聲頻率和時間,超聲容易激發(fā)一些自由基,對抗原有未知損害。乳化方法要根據(jù)抗原和需要而定。
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