透析的原理和過程

一、透析的原理

透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋內，而鹽和小分子物質不斷擴散透析到袋外，直到袋內外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內未透析出的樣品溶液稱為“保留液”，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。

透析的動力是擴散壓，擴散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶質在膜內外兩邊的濃度梯度，還正比于膜的面積和溫度，通常是4℃透析，升高溫度可加快透析速度。

二、透析的過程

1）把適量的透析液（緩沖液）加入透析裝置。透析液的體積應為樣品體積量的100倍。（例如，在1L透析液中透析10ml的樣品）

2）裁剪適當長度的透析管。預留一段額外長度（約占總樣品體積量的20%）作為頭部空間。

3）把透析管插入打開的透析夾，在約超出透析夾3-5mm的位置再夾住。不要折疊透析袋。

4）由透析管開口端將樣品裝入。調整一下頂部空間的長度，夾緊透析夾。

5）把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。

6）透析要根據具體的應用需求。通常情況下，允許過夜透析。在持續透析的過程中，至少要進行3次全部更換透析液。建議在（透析后）2-4小時，6-8小時和10-14小時（第二天早晨）更換透析液。在最后一次透析液的更換后，要至少繼續進行2小時的透析。

注意：對于高濃度污染物，樣品可能需要較長的時間透析，透析液需要更頻繁的更換。

7）透析溫度主要取決于樣品。溫度最高限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達37℃。再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達60℃。

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