特點:
1.高效、靈敏、特異的抗體。
2.穩定的重復性和可靠性。
3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體。
4.適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等多種標本類型。
5.節省實驗經費。
操作方法
1.標準品的稀釋,請按照說明書進行操作。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3. 加樣:不規范的移液操作可能帶來誤差。
1)空白孔,空白對照孔不加樣品,生物素標記的抗NE抗體,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;
2)標準品孔:加入標準品50ul,鏈霉親和素-HRP50ul(標準品中已事先整合好生物素抗體,故不加);
3)待測樣品孔:加入樣本40ul,然后各加入抗NE抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul,蓋上封板膜,輕輕震蕩混勻,37℃溫育60分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 顯色:每孔先加入顯色劑A50ul,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
7. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后10分鐘以內進行。
9. 根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。
友情鏈接:
上海聯碩官網